Microbiologia medica II: sterilizzazione, diagnosi di laboratorio e risposta immunitaria

Di Nikolas Morein, Merim Kumars e Gerald Dunders

La sterilizzazione si riferisce a qualsiasi processo che elimina, uccide o disattiva tutte le forme di vita (in particolare riferendosi a microrganismi come funghi, batteri, virus, spore, organismi eucariotici unicellulari come Plasmodium, ecc.) e altri agenti biologici come i prioni presenti in una specifica superficie, oggetto o fluido. La presentazione clinica di una malattia infettiva riflette l'interazione tra l'ospite e il microrganismo. La diagnosi di laboratorio richiede informazioni composte, tra cui storia, esame fisico, reperti radiografici e dati di laboratorio. Una risposta immunitaria è una reazione che si verifica all'interno di un organismo allo scopo di difendersi dagli invasori. Questi invasori includono un'ampia varietà di microrganismi diversi tra cui virus, batteri, parassiti e funghi che potrebbero causare seri problemi alla salute dell'organismo ospite se non eliminati dal corpo. Contenuti di questo libro: Sterilizzazione, Sterilizzazione a calore umido, Livello di garanzia di sterilità, Tallidallizzazione, Sterilizzazione a calore secco, Asepsi, Antisettico, Elenco degli strumenti utilizzati nella sterilizzazione e disinfezione microbiologiche, resistenza antimicrobica, resistenza multipla ai farmaci, precauzioni basate sulla trasmissione, principi di diagnosi, diagnosi di laboratorio delle infezioni virali, estrapolazione in vitro, in vitro, estrapolazione in vitro, microscopia, diagnostica molecolare, patogenomica, nucleica test dell'acido, sierologia, anticorpo, strumenti utilizzati in microbiologia, microbiologia dell'impedenza, isolamento, analisi batteriologica dell'acqua, dosaggio, Isolamento, Analisi batteriologica dell'acqua, Saggio, Isolamento, Analisi batteriologica dell'acqua, Saggio, Immunoassay, Antigene, Anticorpo microarray, Interazione antigene-anticorpo, Sistema immunitario, Risposta immunitaria, Risposta delle cellule B policlonali, Sistema immunitario innato, Sistema immunitario adattivo, Tolleranza immunitaria, Cellula linfoide innata, Immunostimolante, Co-stimolazione, Infiammazione
Authors: Nikolas Morein, Merim Kumars, Gerald Dunders

• Lingua: Italiano
• Editore: Cambridge Stanford Books
• Data di uscita: 24 set 2020
• ISBN: 9781005356897

Anteprima del libro

Sterilizzazione

La sterilizzazione si riferisce a qualsiasi metodo che elimina, uccide o disattiva tutte le forme di vita (in particolare riferendosi a microrganismi come illustrato da funghi, batteri, virus, spore, organismi eucarioti unicellulari come illustrato da Plasmodium, ecc.) E altri agenti biologici come i prioni presenti in una superficie, un oggetto o un fluido specifico, come il cibo o i terreni di coltura biologici. La sterilizzazione può essere ottenuta con vari mezzi, inclusi calore, prodotti chimici, irradiazione, alta pressione e filtrazione. La sterilizzazione è diversa dalla disinfezione, sanificazione e pastorizzazione, in quanto questi metodi riducono invece di eliminare tutte le forme di vita e gli agenti biologici presenti. Dopo la sterilizzazione, un oggetto viene definito sterile o asettico.

Applicazioni

Alimenti

Uno dei primi passi verso una sterilizzazione modernizzata è stato compiuto da Nicolas Appert, il quale ha scoperto che l'applicazione completa del calore per un periodo adeguato ha rallentato la decomposizione degli alimenti e di vari liquidi, conservandoli per un consumo sicuro per un tempo più lungo del normale. L'inscatolamento degli alimenti è un'estensione dello stesso principio e ha contribuito a ridurre i disturbi di origine alimentare (intossicazione alimentare). Altri metodi di sterilizzazione degli alimenti includono l'irradiazione degli alimenti e l'alta pressione (pascalizzazione). La sterilizzazione negli alimenti è uno dei passaggi più importanti per garantire la conservazione degli alimenti nell'industria alimentare. Ci sono molte tecniche utilizzate per aiutare questo metodo. Uno di questi processi sarebbe il trattamento termico.Il trattamento termico interrompe l'attività batterica ed enzimatica che quindi porta a diminuire le possibilità di alimenti di bassa qualità pur mantenendo la vita degli alimenti non deperibili. Un tipo specifico di trattamento termico utilizzato sarebbe la sterilizzazione UHT (Ultra-High Temperature). Questo tipo di trattamento termico si concentra sulla sterilizzazione oltre i 100 gradi Celsius. Altri due tipi di sterilizzazione sono la sterilizzazione con calore umido e secco. Durante la sterilizzazione a calore umido, le temperature utilizzate variano da 110 a 130 gradi Celsius. Il tempo minimo per la sterilizzazione con calore umido sarebbe di 20 minuti e 40 minuti è il massimo. Scilicet, maggiore è il calore, il tempo per la sterilizzazione si accorcia.L'uso della sterilizzazione a calore secco utilizza tempi di suscettibilità più lunghi che possono durare fino a 2 ore e che utilizzano temperature molto più elevate rispetto alla sterilizzazione a calore umido. Queste temperature possono variare da 160 a 180 gradi Celsius.

Medicina e chirurgia

In generale, gli strumenti chirurgici e i farmaci che entrano in una parte del corpo già asettica (come il flusso sanguigno o che penetrano nella pelle) devono essere sterili. Esempi di tali strumenti includono bisturi, aghi ipodermici e pacemaker artificiali. Questo è inoltre essenziale nella produzione di farmaci parenterali.

La preparazione di farmaci iniettabili e soluzioni endovenose per la terapia sostitutiva dei fluidi richiede non solo la sterilità, ma anche contenitori ben progettati per impedire l'ingresso di agenti avventizi dopo la sterilizzazione iniziale del prodotto.

La maggior parte dei dispositivi medici e chirurgici utilizzati nelle strutture sanitarie sono realizzati con materiali che possono essere sottoposti a sterilizzazione a vapore. Anche se, dal 1950, c'è stato un aumento dei dispositivi medici e degli strumenti realizzati con materiali (ad esempio, plastica) che richiedono la sterilizzazione a bassa temperatura. Il gas di ossido di etilene è stato utilizzato dagli anni '50 per dispositivi medici sensibili al calore e all'umidità. Negli ultimi 15 anni, sono stati sviluppati numerosi nuovi sistemi di sterilizzazione a bassa temperatura (ad es. Perossido di idrogeno vaporizzato, immersione in acido peracetico, ozono) e vengono utilizzati per sterilizzare dispositivi medici.

La sterilizzazione a vapore è la più utilizzata e la più affidabile. La sterilizzazione a vapore è atossica, poco costosa, rapidamente microbicida, sporicida e riscalda e penetra rapidamente nei tessuti.

Navicella spaziale

Esistono rigide regole internazionali per proteggere la contaminazione dei corpi del sistema solare da materiale biologico proveniente dalla Terra. Gli standard variano a seconda del tipo di missione e della sua destinazione; più è probabile che un pianeta sia considerato abitabile, più severi sono i requisiti.

Molti componenti degli strumenti utilizzati sui veicoli spaziali non possono resistere a temperature molto elevate, quindi le tecniche che non richiedono temperature eccessive sono utilizzate come tollerate, compreso il riscaldamento ad almeno 120 ° C (248 ° F), la sterilizzazione chimica, l'ossidazione, l'ultravioletto e l'irradiazione.

Quantificazione

Lo scopo della sterilizzazione è la riduzione dei microrganismi inizialmente presenti o di altri potenziali patogeni. Il grado di sterilizzazione è chiaramente espresso da multipli del tempo di riduzione decimale, o valore D, che denota il tempo necessario per ridurre il numero iniziale N 0 a un decimo (10 - 1) del suo valore originale. Quindi il numero di microrganismi N dopo il tempo di sterilizzazione t è dato da:

N ∕ N 0 = 10 (- t ∕ D)

Il valore D è un servizio delle condizioni di sterilizzazione e varia a seconda del tipo di microrganismo, temperatura, attività dell'acqua, pH ecc. Per la sterilizzazione a vapore (vedi sotto) comunemente la temperatura, in gradi Celsius, è data come indice.

Teoricamente, la probabilità di sopravvivenza di un singolo microrganismo non è mai zero. Per compensare ciò, viene spesso utilizzata l'azione overkill. Utilizzando l'azione overkill, la sterilizzazione viene eseguita sterilizzando più a lungo di quanto necessario per eliminare la carica batterica presente sull'oggetto o nell'oggetto da sterilizzare. Ciò fornisce un livello di garanzia di sterilità (SAL) pari alla probabilità di un'unità non sterile.

Per applicazioni ad alto rischio, come illustrato da dispositivi medici e iniezioni, è richiesto un livello di garanzia di sterilità di almeno 10 −6dalla Food and Drug Administration (FDA) degli Stati Uniti.

Calore

Vapore

Un'azione ampiamente utilizzata per la sterilizzazione a caldo è l'autoclave, a volte chiamata convertitore o sterilizzatore a vapore. Le autoclavi utilizzano vapore riscaldato a 121–134 ° C (250–273 ° F) sotto pressione. Per ottenere la sterilità, l'articolo viene posto in una camera e riscaldato mediante vapore iniettato fino a quando l'articolo raggiunge una temperatura e un tempo prestabiliti. Quasi tutta l'aria viene espulsa dalla camera, in quanto l'aria è indesiderata nel metodo di sterilizzazione a calore umido (questa è una caratteristica che differisce da una tipica pentola a pressione utilizzata per la cottura dei cibi). L'articolo viene mantenuto alla temperatura di setpoint per un periodo di tempo che varia a seconda della carica batterica presente sull'articolo da sterilizzare e della sua resistenza (valore D) alla sterilizzazione a vapore. Un ciclo generale dovrebbe essere compreso tra 3 e 15 minuti,(a seconda del calore generato) a 121 ° C (250 ° F) a 100 kPa (15 psi), che è sufficiente per fornire un livello di garanzia di sterilità di 10−4per un prodotto con una carica batterica di 10 ⁶ e un valore D di 2,0 minuti. Dopo la sterilizzazione, i liquidi in un'autoclave pressurizzata devono essere raffreddati lentamente per evitare l'ebollizione quando viene rilasciata la pressione. Ciò può essere ottenuto depressurizzando gradualmente la camera di sterilizzazione e consentendo ai liquidi di evaporare sotto pressione negativa, mentre si raffredda il contenuto.

Un corretto trattamento in autoclave disattiverà tutte le spore batteriche resistenti allo stesso modo a funghi, batteri e virus, ma non si prevede che elimini tutti i prioni, che variano nella loro resistenza. Per l'eliminazione dei prioni, varie raccomandazioni indicano 121–132 ° C (250–270 ° F) per 60 minuti o 134 ° C (273 ° F) per almeno 18 minuti. Il prione di scrapie 263K viene inattivato in modo relativamente rapido da tali procedure di sterilizzazione; anche se altri ceppi di scrapie e ceppi di Creutzfeldt-Jakob sofferente (CKD) e dell'encefalopatia spongiforme bovina( BSE) sono più resistenti. Utilizzando i topi come animali da test, un esperimento ha dimostrato che il riscaldamento del tessuto cerebrale positivo BSE a 134-138 ° C per 18 minuti ha comportato una diminuzione dell'infettività prionica di solo 2,5 log.

La maggior parte delle autoclavi dispone di misuratori e grafici che registrano o visualizzano informazioni, in particolare temperatura e pressione come servizio del tempo. Le informazioni vengono controllate per garantire che le condizioni richieste per la sterilizzazione siano state soddisfatte. Il nastro indicatore viene spesso posizionato sulle confezioni dei prodotti prima della sterilizzazione in autoclave e alcuni imballaggi incorporano indicatori. L'indicatore cambia colore se esposto al vapore, fornendo una conferma visiva.

I bioindicatori possono inoltre essere utilizzati per confermare in modo indipendente l'esecuzione dell'autoclave. Sono disponibili in commercio semplici dispositivi bioindicatori, basati su spore microbiche. La maggior parte contiene spore del microbo resistente al calore Geobacillus stearothermophilus (precedentemente Bacillus stearothermophilus), che è estremamente resistente alla sterilizzazione a vapore. Gli indicatori biologici possono assumere la forma di fiale di vetro di spore e mezzi liquidi, o come spore su strisce di carta all'interno di buste glassine. Questi indicatori sono posizionati in punti in cui è difficile raggiungere il vapore per verificare che il vapore vi penetri.

Per la sterilizzazione in autoclave, la pulizia è fondamentale. Materie biologiche estranee o sporcizia possono proteggere gli organismi dalla penetrazione del vapore. Una corretta pulizia può essere ottenuta mediante lavaggio fisico, sonicazione, ultrasuoni o aria pulsata.

La cottura a pressione e l'inscatolamento sono analoghe alla sterilizzazione in autoclave e, se eseguite correttamente, rendono il cibo sterile.

Il calore umido provoca la distruzione dei microrganismi denaturando le macromolecole, prevalentemente proteine. Questa azione è un metodo più veloce rispetto alla sterilizzazione a calore secco.

Calore secco

Il calore secco è stata la prima azione di sterilizzazione ed è un metodo più lungo rispetto alla sterilizzazione a calore umido. La distruzione dei microrganismi attraverso l'uso del calore secco è un fenomeno graduale. Con un'esposizione più lunga a temperature letali, il numero di microrganismi uccisi aumenta. La ventilazione forzata di aria calda può essere utilizzata per aumentare la velocità con cui il calore viene trasferito a un organismo e ridurre la temperatura e la quantità di tempo necessaria per ottenere la sterilità. A temperature più elevate, sono necessari tempi di esposizione più brevi per uccidere gli organismi. Ciò può ridurre i danni causati dal calore ai prodotti alimentari.

L'impostazione standard per un forno ad aria calda è di almeno due ore a 160 ° C (320 ° F). Un'azione rapida riscalda l'aria a 190 ° C (374 ° F) per 6 minuti per gli oggetti non imbustati e 12 minuti per gli oggetti avvolti. Il calore secco ha il vantaggio di poter essere utilizzato su polveri e altri oggetti termostabili che sono influenzati negativamente dal vapore (es. Non provoca la ruggine degli oggetti in acciaio).

Fiammeggiante

La fiamma viene eseguita su anelli di inoculazione e fili diritti nei laboratori di microbiologia per striature. Lasciare il circuito nella fiamma di un becco Bunsen o di un fornello ad alcool fino a quando non si illumina di rosso garantisce che qualsiasi agente infettivo sia inattivato. Questo è chiaramente usato per piccoli oggetti in metallo o vetro, ma non per oggetti di grandi dimensioni (vedi Incenerimento sotto). Anche se, durante il riscaldamento iniziale, materiale infettivo può essere spruzzato dalla superficie del filo prima che venga ucciso, contaminando le superfici e gli oggetti vicini. In conclusione, sono stati sviluppati riscaldatori speciali che circondano il circuito di inoculo con una gabbia riscaldata, assicurando che tale materiale spruzzato non contamini ulteriormente l'area. Un altro problema è che le fiamme del gas possono lasciare carbone o altri residui sull'oggetto se l'oggetto non è sufficientemente riscaldato.Una variazione della fiamma consiste nell'immergere l'oggetto in una soluzione concentrata al 70% o più di etanolo, quindi toccare brevemente l'oggetto con la fiamma di un becco Bunsen. L'etanolo si accenderà e brucerà rapidamente, lasciando meno residui di una fiamma a gas

Incenerimento

L'incenerimento è un metodo di trattamento dei rifiuti che prevede la combustione di sostanze organiche contenute nei materiali di scarto. Questa azione inoltre brucia qualsiasi organismo in cenere. Viene utilizzato per sterilizzare rifiuti medici e altri rifiuti a rischio biologico prima di essere smaltiti con rifiuti non pericolosi. Bacteria Gli inceneritori sono mini forni che inceneriscono e uccidono eventuali microrganismi che possono trovarsi su un circuito o filo di inoculo.

Tindalizzazione

Prende il nome da John Tyndall, è un metodo obsoleto e lungo progettato per ridurre il livello di attività dei batteri sporulanti che sono lasciati da una semplice azione dell'acqua bollente. Il metodo prevede l'ebollizione per un periodo (in genere 20 minuti) a pressione atmosferica, il raffreddamento, l'incubazione per un giorno e quindi la ripetizione del metodo per un totale di tre o quattro volte. I periodi di incubazione servono a consentire alle spore resistenti al calore sopravvissute al precedente periodo di ebollizione di germogliare per formare la fase vegetativa (crescita) sensibile al calore, che può essere uccisa dalla fase di ebollizione successiva. Questo è efficace perché molte spore sono stimolate a crescere dallo shock termico. La modalità di funzionamento funziona solo per i terreni che possono supportare la crescita batterica e non sterilizzano i substrati non nutritivi come l'acqua. Inoltre è inefficace contro i prioni.

Sterilizzatori a sfere di vetro

Gli sterilizzatori con microsfere di vetro funzionano riscaldando le microsfere di vetro a 250 ° C (482 ° F). Gli strumenti vengono quindi rapidamente immersi in queste perle di vetro, che riscaldano l'oggetto mentre raschiano fisicamente i contaminanti dalla loro superficie. Gli sterilizzatori a sfere di vetro erano una volta un'azione di sterilizzazione comune impiegata negli studi dentistici oltre che come laboratori biologici, ma non sono approvati dalla Food and Drug Administration (FDA) degli Stati Uniti e dai Centers for ailing Control and Prevention( CDC) per essere utilizzati come sterilizzatori dal 1997. Sono ancora popolari negli studi dentistici europei e israeliani, nonostante non ci siano attualmente linee guida basate sull'evidenza per l'utilizzo di questo sterilizzatore.

Sterilizzazione chimica

I prodotti chimici sono inoltre utilizzati per la sterilizzazione. Il riscaldamento fornisce un modo affidabile per liberare gli oggetti da tutti gli agenti trasmissibili, ma non è sempre appropriato se danneggia i materiali sensibili al calore come illustrato da materiali biologici, fibre ottiche, elettronica e molte plastiche. In queste situazioni possono essere utilizzati come sterilizzanti prodotti chimici, sia in forma gassosa che liquida. Considerando che l'uso di sterilizzanti chimici a gas e liquidi evita il problema dei danni da calore, gli utenti devono assicurarsi che l'articolo da sterilizzare sia chimicamente compatibile con lo sterilizzante utilizzato e che lo sterilizzante sia in grado di raggiungere tutte le superfici che devono essere sterilizzate (tipicamente non può penetrare nell'imballaggio). Allo stesso modo, l'uso di sterilizzanti chimici pone nuove sfide per la sicurezza sul lavoro,poiché le proprietà che rendono le sostanze chimiche sterilizzanti efficaci le rendono abitualmente dannose per l'uomo. La modalità di funzionamento per la rimozione dei residui sterilizzanti dai materiali sterilizzati varia a seconda della sostanza chimica e del metodo utilizzato.

Ossido di etilene

Il trattamento del gas con ossido di etilene (EO, EtO) è uno dei metodi più comuni utilizzati per sterilizzare, pastorizzare o disinfettare gli articoli a causa della sua vasta gamma di compatibilità dei materiali. Viene inoltre utilizzato per trattare oggetti sensibili alla lavorazione con altri metodi, come illustrato dalla radiazione (gamma, fascio di elettroni, raggi X), calore (umido o secco) o altri prodotti chimici. Il trattamento con ossido di etilene è l'azione di sterilizzazione chimica più comune, utilizzata per circa il 70% delle sterilizzazioni totali e per oltre il 50% di tutti i dispositivi medici usa e getta.

Il trattamento con ossido di etilene viene effettuato costantemente tra 30 e 60 ° C (86 e 140 ° F) con umidità relativa superiore al 30% e una concentrazione di gas compresa tra 200 e 800 mg / l. Di solito, il metodo dura diverse ore. L'ossido di etilene è altamente efficace, poiché penetra in tutti i materiali porosi e può penetrare attraverso alcuni materiali plastici e film. L'ossido di etilene uccide tutti i microrganismi conosciuti, come illustrato da batteri (comprese le spore), virus e funghi (inclusi lieviti e muffe) ed è compatibile con quasi tutti i materiali anche se applicati ripetutamente. È infiammabile, tossico e cancerogeno; anche se, solo con un potenziale rischio di alcuni effetti nocivi per la salute quando non utilizzato in conformità con i requisiti pubblicati. Gli sterilizzatori e i processi a ossido di etilene richiedono una convalida biologica dopo l'installazione dello sterilizzatore,riparazioni significative o modifiche al metodo.

Il metodo tradizionale consiste in una fase di precondizionamento (in una stanza o cella separata), una fase di lavorazione (più chiaramente in un recipiente a vuoto e talvolta in un recipiente a pressione nominale) e una fase di aerazione (in una stanza o cella separata) da rimuovere Residui di EO e sottoprodotti inferiori come illustrato dalla cloridrina etilenica (EC o ECH) e, di minore importanza, glicole etilenico (EG). Per alcuni prodotti esiste inoltre un metodo alternativo, noto come lavorazione all-in-one, per cui tutte e tre le fasi vengono eseguite nel recipiente a vuoto o pressione. Quest'ultima opzione può facilitare un tempo di elaborazione e una dissipazione dei residui più rapidi.

L'azione di elaborazione EO più comune è l'azione della camera a gas. Per beneficiare delle economie di scala, l'EO è stato tradizionalmente fornito riempiendo una grande camera con una combinazione di EO gassoso come EO puro, o con altri gas usati come diluenti; i diluenti includono clorofluorocarburi (CFC), idroclorofluorocarburi (HCFC) e anidride carbonica.

L'ossido di etilene è ancora ampiamente utilizzato dai produttori di gadget medici. Poiché l'EO è esplosivo a concentrazioni superiori al 3%, l'EO veniva tradizionalmente fornito con un gas di trasporto inerte, come illustrato da un CFC o HCFC. L'uso di CFC o HCFC come gas di trasporto è stato vietato per motivi di impoverimento dell'ozono. Questi idrocarburi alogenati stanno per essere sostituiti da sistemi che utilizzano il 100% di EO, a causa delle normative e dell'alto costo delle miscele. Negli ospedali, la maggior parte degli sterilizzatori EO utilizza cartucce monouso per la praticità e la facilità d'uso rispetto alle precedenti bombole di gas a piombo delle miscele EO.

È importante rispettare i limiti specificati dal governo del paziente e del personale sanitario per i residui di EO nei e / o sui prodotti lavorati, l'esposizione dell'operatore dopo la lavorazione, durante lo stoccaggio e la manipolazione delle bombole di gas EO e le emissioni ambientali prodotte quando si utilizza l'EO.

La US Occupational Safety and Health Administration (OSHA) ha fissato il limite di esposizione consentito (PEL) a 1 ppm - calcolato come media ponderata nel tempo (TWA) di otto ore - e a 5 ppm come escursione di 15 minuti limite (EL). Il limite immediatamente pericoloso per la vita e la salute (IDLH) del National Institute for Occupational Safety and Health (NIOSH) per EO è 800 ppm. La soglia dell'odore è di circa 500 ppm, quindi l'EO è impercettibile fino a quando le concentrazioni non sono ben al di sopra dell'OSHA PEL. In conclusione, l'OSHA raccomanda di utilizzare sistemi di monitoraggio continuo del gas per proteggere i lavoratori che utilizzano l'EO per la lavorazione.

Diossido di azoto

Il gas di biossido di azoto (NO 2) è uno sterilizzante rapido ed efficace per l'uso contro un'ampia gamma di microrganismi, inclusi batteri, virus e spore comuni. Le proprietà fisiche uniche del gas NO 2 consentono la dispersione di sterilizzante in un ambiente chiuso a temperatura ambiente e pressione atmosferica. Il meccanismo della letalità è la degradazione di DNA nel nucleo delle spore attraverso la nitrazione della spina dorsale del fosfato, che uccide l'organismo esposto mentre assorbe NO 2. Questa degradazione si verifica anche a concentrazioni molto basse del gas. NO 2 ha un punto di ebollizione di 21 ° C (70 ° F) a livello del mare, il che si traduce in una pressione di vapore relativamente alta a temperatura ambiente. Per questo motivo, il liquido NO2 può essere utilizzato come una fonte conveniente per il gas sterilizzante. Il liquido NO 2 è spesso indicato con la denominazione del suo dimer, tetrossido di dimer diazoto (N 2 O 4). Allo stesso modo, i bassi livelli di concentrazione richiesti, insieme all'elevata tensione di vapore, assicurano che non si formi condensa sui dispositivi da sterilizzare. Ciò significa che non è necessaria alcuna aerazione dei dispositivi immediatamente dopo il ciclo di sterilizzazione. Inoltre, l' NO 2 è meno corrosivo di altri gas sterilizzanti ed è compatibile con la maggior parte dei materiali e degli adesivi medici.

L'organismo più resistente (MRO) alla sterilizzazione con gas NO 2 è la spora di Geobacillus stearothermophilus, che è la stessa MRO sia per i processi di sterilizzazione con vapore che con perossido di idrogeno. La forma delle spore di G. Stearothermophilus è stata ben caratterizzata nel corso degli anni come indicatore biologico nelle applicazioni di sterilizzazione. Inattivazione microbica di G. Stearothermophilus con NO 2il gas procede rapidamente in modo log-lineare, come è tipico di altri processi di sterilizzazione. Noxilizer, Inc. ha commercializzato questa tecnologia per offrire servizi di sterilizzazione a contratto per dispositivi medici presso la sua struttura di Baltimora, Maryland (USA). Ciò è stato dimostrato nel laboratorio di Noxilizer in più studi ed è supportato da rapporti pubblicati da altri laboratori. Queste stesse proprietà inoltre consentono una più rapida rimozione dei gas sterilizzanti e residui attraverso l'aerazione dell'ambiente chiuso. La combinazione di rapida letalità e facile rimozione del gas consente tempi di ciclo più brevi durante il metodo di sterilizzazione (o decontaminazione) e un livello inferiore di residui sterilizzanti rispetto a quelli riscontrati con altri metodi di sterilizzazione.

Ozono

L'ozono viene utilizzato negli ambienti industriali per sterilizzare l'acqua e l'aria, oltre che come disinfettante per le superfici. Ha il vantaggio di poter ossidare la maggior parte della materia organica. Tuttavia, è un gas tossico e instabile che deve essere prodotto in loco, quindi non è pratico da utilizzare in molti ambienti.

L'ozono offre molti vantaggi come gas sterilizzante; l'ozono è uno sterilizzante molto efficiente grazie alle sue forti proprietà ossidanti (E = 2.076 vs SHE) in grado di distruggere un'ampia gamma di agenti patogeni, inclusi i prioni, senza la necessità di manipolare sostanze chimiche pericolose poiché l'ozono è generato all'interno dello sterilizzatore da medici -gradi ossigeno. L'elevata reattività dell'ozono significa che l'ozono di scarto può essere distrutto passando su un semplice catalizzatore che lo converte in ossigeno e garantisce che il tempo di ciclo sia relativamente breve. Lo svantaggio dell'utilizzo dell'ozono è che il gas è molto reattivo e molto pericoloso. Il limite immediatamente pericoloso per la vita e la salute (IDLH) del NIOSH per l'ozono è 5 ppm, 160 volte inferiore a 800 ppm IDLH per ossido di etilene. NIOSH e OSHA hanno fissato il PEL per l'ozono a 0,1 ppm, calcolato come una media ponderata nel tempo di otto ore. I produttori di gas sterilizzanti includono molte caratteristiche di sicurezza nei loro prodotti, ma una pratica prudente è quella di fornire un monitoraggio continuo dell'esposizione all'ozono, in genere per fornire un avviso rapido in caso di perdita. Sono disponibili in commercio monitor per determinare l'esposizione del luogo di lavoro all'ozono.

Glutaraldeide e formaldeide

Le soluzioni di glutaraldeide e formaldeide (usate anche come fissativi) sono agenti sterilizzanti liquidi accettati, a condizione che il tempo di immersione sia sufficientemente lungo. Per uccidere tutte le spore in un liquido trasparente possono essere necessarie fino a 22 ore con glutaraldeide e anche di più con formaldeide. La presenza di particelle solide può allungare il periodo richiesto o rendere inefficace il trattamento. La sterilizzazione di blocchi di tessuto può richiedere molto più tempo, a causa del tempo necessario per la penetrazione del fissativo. La glutaraldeide e la formaldeide sono volatili e tossiche sia per contatto con la pelle che per inalazione. La glutaraldeide ha una breve durata (<2 settimane) ed è costosa. La formaldeide è meno costosa e ha una durata di conservazione molto più lunga se viene aggiunto del metanolo per inibire la polimerizzazione alla paraformaldeide, ma è molto più volatile.La formaldeide è inoltre utilizzata come agente sterilizzante gassoso; in questo caso viene preparato in loco mediante depolimerizzazione di paraformaldeide solida. Molti vaccini, come illustrato dal vaccino antipolio Salk originale, sono sterilizzati con formaldeide.

Perossido di idrogeno

Il perossido di idrogeno, sia liquido che sotto forma di perossido di idrogeno vaporizzato (VHP), è un altro agente sterilizzante chimico. Il perossido di idrogeno è un forte ossidante, che gli consente di distruggere una vasta gamma di agenti patogeni. Il perossido di idrogeno viene utilizzato per sterilizzare articoli sensibili al calore o alla temperatura, come illustrato da endoscopi rigidi. Nella sterilizzazione medica, il perossido di idrogeno viene utilizzato a concentrazioni più elevate, che vanno dal 35% circa al 90%. Il più grande vantaggio del perossido di idrogeno come sterilizzante è il breve tempo di ciclo. Mentre il tempo di ciclo per l'ossido di etilene può essere compreso tra 10 e 15 ore, alcuni moderni sterilizzatori a perossido di idrogeno hanno un tempo di ciclo di soli 28 minuti.

Gli svantaggi del perossido di idrogeno includono la compatibilità dei materiali, una minore capacità di penetrazione e rischi per la salute dell'operatore. I prodotti contenenti cellulosa, come illustrato dalla carta, non possono essere sterilizzati utilizzando VHP e i prodotti contenenti nylon possono diventare fragili. L'abilità penetrante del perossido di idrogeno non è buona come l'ossido di etilene e quindi ci sono limitazioni sulla lunghezza e sul diametro del lume degli oggetti che possono essere efficacemente sterilizzati. Il perossido di idrogeno è un irritante primario e il contatto della soluzione liquida con la pelle provoca sbiancamento o ulcerazione a seconda della concentrazione e del tempo di contatto. È relativamente non tossico se diluito a basse concentrazioni, ma è un pericoloso ossidante ad alte concentrazioni (> 10% p / p). Il vapore è inoltre pericoloso, colpisce prevalentemente gli occhi e il sistema respiratorio.Anche le esposizioni a breve termine possono essere pericolose e NIOSH ha impostato l'IDLH a 75 ppm, meno di un decimo dell'IDLH per l'ossido di etilene (800 ppm). L'esposizione prolungata a concentrazioni inferiori può causare danni permanenti ai polmoni e, pertanto, l'OSHA ha fissato il limite di esposizione consentito a 1,0 ppm, calcolato come una media ponderata nel tempo di otto ore. I produttori di sterilizzatori fanno di tutto per rendere sicuri i loro prodotti attraverso un'attenta disposizione e incorporazione di molte caratteristiche di sicurezza, tuttavia ci sono ancora esposizioni sul posto di lavoro di perossido di idrogeno da sterilizzatori a gas documentate nel database FDA MAUDE. Quando si utilizza qualsiasi tipo di sterilizzatore a gas, le pratiche di lavoro prudenti dovrebbero includere una buona ventilazione, un monitoraggio continuo del gas per il perossido di idrogeno e buone pratiche di lavoro e formazione.

Il perossido di idrogeno vaporizzato (VHP) viene utilizzato per sterilizzare ampie aree chiuse e sigillate, come illustrato da intere stanze e interni di aeromobili.

Sebbene tossico, il VHP si scompone in breve tempo in acqua e ossigeno.

Acido peracetico

L'acido peracetico (0,2%) è uno sterilizzante riconosciuto dalla FDA per l'uso nella sterilizzazione di dispositivi medici come illustrato dagli endoscopi.

Potenziale di sterilizzazione chimica dei prioni

I prioni sono altamente resistenti alla sterilizzazione chimica. Il trattamento con aldeidi, come illustrato dalla formaldeide, ha effettivamente dimostrato di aumentare la resistenza ai prioni. Il perossido di idrogeno (3%) per un'ora si è dimostrato inefficace, fornendo una riduzione della contaminazione inferiore a 3 log (10 −3). Lo iodio, la formaldeide, la glutaraldeide e l'acido peracetico non superano questo test (trattamento di un'ora). Solo cloro, composti fenolici, tiocianato di guanidinio e idrossido di sodio riducono i livelli di prioni di oltre 4 log; il cloro (troppo corrosivo per essere utilizzato su determinati oggetti) e l'idrossido di sodio sono i più consistenti. Molti studi hanno dimostrato l'efficacia dell'idrossido di sodio.

Sterilizzazione con radiazioni

La sterilizzazione può essere ottenuta usando radiazioni elettromagnetiche, come illustrato da fasci di elettroni, raggi X, raggi gamma o irradiazione da particelle subatomiche. Le radiazioni elettromagnetiche o particellari possono essere abbastanza energetiche da ionizzare atomi o molecole (radiazioni ionizzanti) o meno energetiche (radiazioni non ionizzanti).

Sterilizzazione con radiazioni non ionizzanti

L'irradiazione della luce ultravioletta (UV, da una lampada germicida) è utile per la sterilizzazione delle superfici e di alcuni oggetti trasparenti. Molti oggetti trasparenti alla luce visibile assorbono i raggi UV. L'irradiazione UV viene abitualmente utilizzata per sterilizzare gli interni delle cabine di sicurezza biologica tra un utilizzo e l'altro, ma è inefficace nelle aree ombreggiate, comprese le aree sotto lo sporco (che possono polimerizzarsi dopo un'irradiazione prolungata, quindi è molto difficile da rimuovere). Inoltre danneggia alcune plastiche, come illustrato dal polistirolo espanso se esposto per periodi di tempo prolungati.

Sterilizzazione con radiazioni ionizzanti

La sicurezza degli impianti di irradiazione è regolata dall'Agenzia internazionale per l'energia atomica delle Nazioni Unite e monitorata dalle disparate Nuclear Regulatory Commissions (NRC) nazionali. Gli incidenti di esposizione alle radiazioni che si sono verificati in passato sono documentati dall'agenzia e analizzati a fondo per determinarne la causa e il potenziale di miglioramento. Tali miglioramenti sono quindi incaricati di aggiornare le strutture esistenti e il layout futuro.

La radiazione gamma è molto penetrante ed è chiaramente utilizzata per la sterilizzazione di apparecchiature mediche usa e getta, come illustrato da siringhe, aghi, cannule, set IV e cibo. Viene emesso da un radioisotopo, solitamente cobalto-60(⁶⁰Co) o cesio-137(¹³⁷Cs), che hanno energie fotoniche fino a 1,3 e 0,66 MeV, rispettivamente.

L'uso di un radioisotopo richiede schermatura per la sicurezza degli operatori durante l'uso e lo stoccaggio. Con la maggior parte dei progetti, il radioisotopo viene abbassato in un serbatoio di accumulo pieno d'acqua, che assorbe le radiazioni e consente al personale di manutenzione di entrare nello schermo antiradiazioni. Una variante mantiene il radioisotopo sempre sott'acqua e abbassa il prodotto da irradiare nell'acqua in campane ermeticamente chiuse; non è inoltre richiesta alcuna schermatura per tali progetti. Un altro design insolitamente utilizzato utilizza lo stoccaggio a secco, fornendo schermi mobili che riducono i livelli di radiazione nelle aree della camera di irradiazione. Un incidente a Decatur, Georgia, USA, dove il cesio-137 solubile in acqua è trapelato nel pool di stoccaggio della sorgente, richiedendo l'intervento dell'NRC ha portato all'uso di questo radioisotopo quasi del tutto interrotto a favore del più costoso,cobalto-60 non idrosolubile. I fotoni gamma del cobalto-60 hanno con riferimento al doppio dell'energia, e inevitabilmente un raggio di penetrazione maggiore, della radiazione prodotta dal cesio-137.

L'elaborazione del fascio di elettroni è inoltre chiaramente utilizzata per la sterilizzazione. I fasci di elettroni utilizzano una tecnologia on-off e forniscono una velocità di dosaggio molto più elevata rispetto ai raggi gamma o X. A causa del tasso di dose più elevato, è necessario un tempo di esposizione inferiore e quindi viene ridotta qualsiasi potenziale degradazione a polimeri. A causa degli elettroni trasportano una carica, i fasci di elettroni sono meno penetranti sia dei raggi gamma che dei raggi X. Le strutture fanno affidamento su notevoli schermi di cemento per proteggere i lavoratori e l'ambiente dall'esposizione alle radiazioni.

I raggi X ad alta energia (prodotti da bremsstrahlung) consentono l'irradiazione di pacchi di grandi dimensioni e carichi di pallet di dispositivi medici. Sono sufficientemente penetranti per trattare carichi multipli di pallet di pacchi a bassa densità con rapporti di uniformità di dose molto buoni. La sterilizzazione a raggi X non richiede materiale chimico o radioattivo: i raggi X ad alta energia sono generati ad alta intensità da un generatore di raggi X che non necessita di schermatura quando non in uso. I raggi X vengono generati bombardando un materiale denso (obiettivo) come illustrato dal tantalio o dal tungsteno con elettroni ad alta energia, in un metodo noto come conversione bremsstrahlung. Questi sistemi sono energeticamente inefficienti e richiedono molta più energia elettrica di altri sistemi per lo stesso effetto.

L'irraggiamento con raggi X, raggi gamma o elettroni non rende i materiali radioattivi, poiché l'energia utilizzata è troppo bassa. È costantemente necessaria un'energia di almeno 10 MeV per indurre la radioattività in un materiale. I neutroni e le particelle ad altissima energia possono rendere i materiali radioattivi, ma hanno una buona penetrazione, mentre le particelle a bassa energia (diverse dai neutroni) non possono rendere i materiali radioattivi, ma hanno una penetrazione più scarsa.

La sterilizzazione mediante irradiazione con raggi gamma può anche influenzare le proprietà del materiale.

L'irradiazione viene utilizzata dalla funzione postale degli Stati Uniti per sterilizzare la posta nell'area di Washington, DC. Alcuni alimenti (es. Spezie e carni macinate) vengono sterilizzati mediante irraggiamento.

Le particelle subatomiche possono essere più o meno penetranti e possono essere generate da un radioisotopo o da un dispositivo, a seconda del tipo di particella.

Filtrazione sterile

I fluidi che sarebbero danneggiati dal calore, dall'irraggiamento o dalla sterilizzazione chimica, come illustrato dalla soluzione del farmaco, possono essere sterilizzati mediante microfiltrazione utilizzando filtri a membrana. Questa azione è chiaramente utilizzata per prodotti farmaceutici termolabili e soluzioni proteiche nella lavorazione di farmaci. Un microfiltro con una dimensione dei pori di solito di 0,22 µm rimuoverà abitualmente efficacemente i microrganismi. Alcune specie stafilococciche, tuttavia, si sono dimostrate sufficientemente flessibili da passare attraverso filtri da 0,22 µm. Nell'elaborazione dei prodotti biologici, i virus devono essere rimossi o inattivati, richiedendo l'uso di nanofiltri con una dimensione dei pori inferiore (20–50 nm). Le dimensioni dei pori più piccole riducono la velocità di flusso, quindi di regola per ottenere un rendimento totale più elevato o per evitare un blocco prematuro, la potenza dei pre-filtri deve essere utilizzata per proteggere i filtri a membrana a pori piccoli.I sistemi di filtraggio tangenziale (TFF) e alternato tangenziale (ATF) inoltre riducono l'accumulo di particolato e il blocco.

I filtri a membrana utilizzati nei processi di produzione sono chiaramente realizzati con materiali come illustrato da esteri misti di cellulosa o polietersulfone (PES). L'apparecchiatura di filtrazione e i filtri stessi possono essere acquistati come unità monouso pre-sterilizzate in imballaggi sigillati o devono essere sterilizzati dall'utente, costantemente in autoclave a una temperatura che non danneggi le fragili membrane del filtro. Per garantire il corretto funzionamento del filtro, i filtri a membrana vengono sottoposti a test di integrità dopo l'uso e talvolta prima dell'uso. Il test di integrità non distruttivo assicura che il filtro non sia danneggiato ed è un requisito normativo. Comunemente, la filtrazione sterile farmaceutica terminale viene eseguita all'interno di una camera bianca per prevenire la contaminazione.

Conservazione della sterilità

Gli strumenti che sono stati sottoposti a sterilizzazione possono essere mantenuti in tali condizioni contenendoli in imballaggi sigillati fino al momento dell'uso.

La tecnica asettica è l'atto di mantenere la sterilità durante le procedure.

Sterilizzazione a calore umido

La sterilizzazione a calore umido descrive le tecniche di sterilizzazione che utilizzano aria calda fortemente carica di vapore acqueo e dove questa umidità svolge un ruolo particolarmente importante nella sterilizzazione. Il riscaldamento di un articolo è una delle prime forme di sterilizzazione praticate. Le varie procedure utilizzate per eseguire il metodo di sterilizzazione a calore umido provocano la distruzione di microrganismi mediante denaturazione delle macromolecole.

Descrizione

Il riscaldamento di un articolo è una delle prime forme di sterilizzazione praticate. I processi di sterilizzazione a calore umido sterilizzano utilizzando aria calda fortemente carica di vapore acqueo, che svolge un ruolo particolarmente importante nella sterilizzazione. L'ebollizione di un campione per 30 minuti o più ucciderà praticamente tutte le cellule vegetative presenti, ma non ucciderà le spore, che possono germogliare poco dopo e riprendere la crescita. In conclusione, l'ebollizione è un'azione insufficiente per ottenere la sterilizzazione.

Azione sui microrganismi

Il calore umido provoca la distruzione dei microrganismi denaturando le macromolecole, prevalentemente proteine. La distruzione delle cellule mediante lisi può inoltre svolgere un ruolo. Mentre la sterilità implica la distruzione di organismi viventi liberi che possono crescere all'interno di un campione, la sterilizzazione non implica necessariamente la distruzione di materia infettiva. I prioni sono un esempio di un agente infettivo che può sopravvivere alla sterilizzazione con calore umido, a seconda delle condizioni.

Validazione

Per facilitare una sterilizzazione efficiente mediante vapore e pressione, sono disponibili diversi metodi di verifica e indicazione; questi includono nastri indicatori che cambiano colore e indicatori biologici. Quando si utilizzano indicatori biologici, i campioni contenenti spore di microbi resistenti al calore, come illustrato da Geobacillus stearothermophilis, vengono sterilizzati insieme a un carico standard e vengono quindi incubati in un terreno sterile (spesso contenuto all'interno del campione in una fiala di vetro da rompere dopo la sterilizzazione). Un cambiamento di colore nel terreno (indicante la produzione di acido da parte dei batteri; richiede che il terreno sia formulato per questo scopo) o la comparsa di torbidità (nuvolosità che indica la dispersione della luce da parte delle cellule batteriche) indica che la sterilizzazione non è stata raggiunta e il ciclo di sterilizzazione potrebbe essere necessario revisione o miglioramento.

Metodi utilizzati

Tindalizzazione

Un'azione più efficace è quella che utilizza tre successivi trattamenti a vapore per ottenere la sterilizzazione nel corso di tre giorni. Funziona uccidendo le cellule vegetative, consentendo la germinazione delle spore sopravvissute e uccidendo le cellule vegetative risultanti prima che abbiano il tempo di formare anche spore. Eventuali spore sopravvissute dal primo trattamento, o spore formate accidentalmente durante il primo periodo di incubazione, vengono uccise in un terzo ciclo di cottura a vapore.

Alta pressione

Un'azione più chiaramente utilizzata quando il calore prolungato non è un problema è usare un'autoclave o una pentola a pressione. Durante la sterilizzazione in questo modo, i campioni vengono posti in una camera del vapore su uno scaffale o un pavimento rialzato e la camera viene chiusa e riscaldata in modo che il vapore costringa l'aria fuori dalle prese d'aria o dagli scarichi. La pressione viene quindi applicata in modo che la temperatura interna raggiunga i 121 ° C (250 ° F) e questa temperatura viene mantenuta per un periodo compreso tra 15 e 30 minuti. Questa temperatura e pressione elevate sono sufficienti per sterilizzare campioni di eventuali microbi o spore chiaramente incontrati. La camera viene quindi lasciata raffreddare lentamente o mediante dissipazione passiva del calore; è raro che venga applicato un raffreddamento forzato o che la pressione venga scaricata deliberatamente. La sterilizzazione a pressione è l'azione prevalente utilizzata per la sterilizzazione medica di strumenti resistenti al calore,e per la sterilizzazione di materiali per la microbiologia e altri campi che richiedono una tecnica asettica.

Nei casi in cui gli articoli devono essere sterilizzati per un uso immediato, può essere utilizzata la sterilizzazione flash. Le tecniche di flash vengono eseguite costantemente per il tempo, la temperatura o la pressione minimi e possono sacrificare alcune misure di protezione, come illustrato dalle capacità di convalidare con indicatori biologici o prevenire la contaminazione. Protocolli aggiuntivi vengono costantemente adottati per mitigare i sacrifici; L'attrezzatura per la sterilizzazione flash è spesso conservata nel campo sterile di una sala operatoria, per il preconfezionamento degli articoli può essere utilizzato un imballaggio protettivo che penetra il vapore, e in particolare possono essere riutilizzati sistemi di contenitori di sterilizzazione rigidi progettati.

Livello di garanzia della sterilità

In microbiologia, il livello di garanzia di sterilità (SAL) è la probabilità che una singola unità che è stata sottoposta a sterilizzazione rimanga comunque non sterile.

Non è mai possibile provare che tutti gli organismi siano stati distrutti, poiché la probabilità di sopravvivenza di un singolo microrganismo non è mai nulla. Quindi SAL viene utilizzato per esprimere la probabilità di sopravvivenza. Ad esempio, i produttori di gadget medici pianificano i loro processi di sterilizzazione per un SAL estremamente basso, come illustrato da ¹⁰-⁶, che è una probabilità di 1 su 1.000.000 di un'unità non sterile. SAL descrive inoltre l'efficienza di uccisione di un metodo di sterilizzazione. Un metodo di sterilizzazione molto efficace ha un SAL molto basso.

Tindalizzazione

La tindallizzazione è un metodo risalente al diciannovesimo secolo per sterilizzare sostanze, abitualmente cibo, dal nome del suo inventore, lo scienziato John Tyndall, che può essere utilizzato per uccidere le endospore resistenti al calore. Nonostante sia considerato vecchio stile, è ancora usato occasionalmente.

Un'azione sterilizzante semplice ed efficace oggi chiaramente utilizzata è l'autoclavaggio: riscaldare la sostanza da sterilizzare a 121 ° C per 15 minuti in un sistema a pressione. Se la sterilizzazione in autoclave non è possibile a causa della mancanza di attrezzature o per la necessità di sterilizzare qualcosa che non resista alla temperatura più elevata, il riscaldamento non pressurizzato per un periodo prolungato a una temperatura fino a 100 ° C, il punto di ebollizione dell'acqua può essere utilizzato. Il calore ucciderà le cellule batteriche; anche se le spore batteriche in grado di germinare successivamente in cellule batteriche possono sopravvivere. Può essere usato per distruggere le spore.

La tintallizzazione consiste in realtà nel riscaldare la sostanza fino al punto di ebollizione (o appena un po 'sotto il punto di ebollizione) e mantenerla lì per 15 minuti, tre giorni in serie. Dopo ogni riscaldamento, il periodo di riposo consentirà alle spore sopravvissute di germogliare in cellule batteriche; queste cellule verranno uccise dal riscaldamento del giorno successivo. Durante i periodi di riposo la sostanza da sterilizzare viene conservata in un ambiente umido a temperatura ambiente calda, favorevole alla germinazione delle spore. Quando l'ambiente è favorevole ai batteri, favorisce la germinazione delle cellule dalle spore e le spore non si formano dalle cellule in questo ambiente (vedi spore batteriche).

Il metodo è normalmente efficace nella pratica. Ma non è considerato del tutto affidabile: alcune spore possono sopravvivere e successivamente germogliare e moltiplicarsi. Non è usato spesso oggi, ma è usato per sterilizzare alcune cose che non possono resistere al riscaldamento pressurizzato, come illustrato dai semi delle piante.

Sterilizzazione a calore secco

La sterilizzazione a calore secco di un articolo è una delle prime forme di sterilizzazione praticate. Utilizza aria calda che è priva di vapore acqueo o ne contiene pochissimo, dove questa umidità gioca un ruolo minimo o nullo nel metodo di sterilizzazione.

Metodo

Il metodo di sterilizzazione a calore secco viene eseguito per conduzione; è qui che il calore viene assorbito dalla superficie esterna di un oggetto e quindi passato verso l'interno allo strato successivo. Alla fine, l'intero articolo raggiunge la temperatura corretta necessaria per ottenere la sterilizzazione. Il tempo e la temperatura corretti per la sterilizzazione a calore secco sono 160 ° C (320 ° F) per 2 ore o 170 ° C (340 ° F) per 1 ora o nel caso di sterilizzatori ad aria calda ad alta velocità 190 ° C (375 ° F) da 6 a 12 minuti.

Gli articoli devono essere asciutti prima della sterilizzazione poiché l'acqua interferirà con il metodo. Il calore secco distrugge i microrganismi provocando la denaturazione delle proteine.

La presenza di umidità, come illustrato